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替抗評估,最低抑菌濃度(MIC)你用對了嗎?

文章來源:建明中國 作者: 更新時間:2020-06-04

  隨著我國飼料禁抗時間節點的臨近,各種各樣的抗生素替代物的信息和產品充斥市場,最低抑菌濃度(MIC)的概念被廣泛應用在許多替抗產品上。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  MIC是評估抗菌藥物的非常好的指標,但是卻被有心人利用成為誤導大家的工具。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  如果要用MIC評估抗生素替代物,我們必須掌握以下幾個知識點:HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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  MIC(最小抑菌濃度)的定義及抗生素作用發揮HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  MIC是指在一定培養基內,能抑制細菌生長的最低藥物濃度即最低抑菌濃度;用于定量測定體外抑菌活性的一個指標,也是研究細菌與藥物相互作用的一個關鍵指標。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  抗生素在體內要發揮殺滅或抑制病原菌的作用,必須在靶組織或器官內達到有效的濃度,并能維持一定的時間。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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  圖1 藥時曲線意義示意圖(獸醫藥理學,第二版)HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  如圖1所示,抗生素非靜注給藥分為潛伏期、持續期、殘留期;潛伏期是指給藥后到開始出現藥效的一段時間;持續期是指藥物維持有效濃度的時間;殘留期是體內藥物已降到有效濃度以下,但尚未完全從體內消除。只有組織或器官內的藥物濃度達到最低有效濃度,而最低有效濃度至少要大于最低抑菌濃度(MIC),并且維持一定的時間,才能起到抑菌殺菌的作用。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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  畜禽飼料促生長抗生素(AGPs)HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  的添加量遠大于MICHVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  2.1 硫酸粘桿菌素對大腸桿菌、沙門氏菌的MIC  HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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  表1 硫酸粘桿菌素對大腸桿菌和沙門氏菌的MIC(ppm)HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  表1 硫酸粘桿菌素對大腸桿菌和沙門氏菌的MIC(ppm)HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  我國1999年版《進口獸藥質量標準》中硫酸粘桿菌素預混劑的畜禽飼料的添加量為2-20 ppm;而當初大多飼料內添加量達到20 ppm,尤其仔豬飼料。如果按照料水比達到2:1,其在腸道溶液中的濃度也會達到10 ppm;大于硫酸粘桿菌素對大腸桿菌和沙門氏菌的MIC。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  2.2 AGPs對產氣莢膜梭菌的MICHVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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  表2 AGPs對產氣莢膜梭菌的MIC(Pedroso,2013)HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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  表3 AGPs對產氣莢膜梭菌的MIC及不同飼料內的添加量(鄒君彪,2013)HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  在飼料工業生產中,飼料內AGPs的添加量基本接近或就是國家規定最大添加劑量,遠高于AGPs對產氣莢膜梭菌的MIC;與硫酸粘桿菌的添加量大于對大腸桿菌和沙門氏菌MIC存在相同的現象。不知道將添加濃度降到MIC,抗生素是否還會有效果。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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  認清MIC的單位,防止混淆視聽HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  抑菌效果是以抗生素替代品在畜禽腸道的實際濃度為基礎的;而很多報告,看到MIC數值很小,但是換算成飼料內的實際添加量,數值卻大得驚人,如見圖2和表4。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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  圖2 某公司產品說明書截圖HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  如圖2所示,MIC的單位為ul/ml,而1 ul/ml≠1 ppm,1 ul/ml=1000 ppm=1 kg/T;1 ug/ml=1 ppm=1 g/T。因此,提醒大家在看數據的時候,一定要關注單位。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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  表4 牛至精油組成及抗菌活性(Ayman Al-Mariril, 2013)HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  從表4可以看出,牛至精油成分中的香芹酚和百里香酚對致病菌的MIC最低,小于0.375 ul/ml?粗杏X數值挺低,但是換算成ppm,就是375 ppm。張赟彬等2015年研究發現肉桂醛對大腸桿菌的MIC為0.25 ul/ml,也就是250 ppm;而想想我們畜禽飼料內植物精油的實際添加量,實際的百里香酚、香芹酚、肉桂醛這些明星分子含量呢,遠遠低于MIC;所以說以對致病菌的MIC作為植物精油的評估標準是不科學的。植物精油(至多興®)主要是通過“抗炎癥、抗氧化、促進腸絨毛健康、促進消化酶的活性”來實現畜禽促生長,能夠減少細菌分泌毒素從而減少腹瀉,所以說動物生產試驗是評估植物精油的唯一科學標準。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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  認清抗生素為對照,HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  以抑菌圈的大小進行抗生素替代物體外抑菌評估HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  抗生素替代物的推薦添加量是不同的,體外MIC在體內復雜的環境下未必能夠達到抑菌的效果。應該以相應抗生素為對照,確保試驗結果的可靠性,比如針對大腸桿菌、沙門氏菌等革蘭氏陰性菌,以抗革蘭氏陰性菌的硫酸粘桿菌素為對照;針對產氣莢膜梭菌,可選擇以抗革蘭氏陽性菌的恩拉霉素為對照;都以畜禽飼料工業中抗生素的實際添加量和抗生素替代品的推薦量進行抑菌圈大小的對比評估;如果體外試驗沒有抑菌效果,體內更加不可能抑菌。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

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  圖3 克洛生TM代謝產物與恩拉霉素對產氣莢膜梭菌抑菌圈大小的比較HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  如圖3,建明公司針對克洛生TM代謝產物與恩拉霉素對產氣莢膜梭菌的抑菌圈的對比結果;克洛生TM 200mg/kg過夜培養,其代謝產物對產氣莢膜梭菌的抑菌圈大小與10 ppm恩拉霉素相當。體外抑菌試對比結果一目了然,針對產氣莢膜梭菌,克洛生TM是非常好的促生長抗生素(AGPs)的替代品。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  綜上所述,雖然MIC是體外評估抗菌藥的一個硬指標,在體內也非常重要。但是要科學的評判和看待,甚至有些報告,MIC評估的方法都有問題,竟然將植物精油通過水溶進行評估,植物精油都是不溶于水的,需要經過特殊處理以后,才能評估。同時,一定要設立抗生素的對照,建議以抗生素的國家規定添加劑量和某些抗生素替代品的推薦添加量進行平板抑菌試驗,以抑菌圈的大小進行評估。HVV中國飼料行業信息網-立足飼料,服務畜牧

  
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